Diferencia entre revisiones de «Fragmento de Okazaki»

El trabajo de [[Kiwako Sakabe]] y el matrimonio [[Tsuneko Okazaki|Okazaki]] aportó evidencias experimentales a la hipótesis que suponía la replicación de ADN como un proceso discontinuo. Anteriormente, era comunmnentecomúnmente aceptado que la replicación era continua en ambas cadenas (3’ 5’ y 5’ 3’). Para indicar la orientación de una cadena de ADN o ARN, se utilizan los números 3’ y 5’, los cuales hacen referencia a la posición de los átomos de carbono dentro de la molécula de [[desoxirribosa]] en los [[ácidos nucléicos]].

Para distinguir experimentalmente el método de replicación del ADN, el equipo marcó radiactivamente áreas recién replicadas de cromosomas de ''E. coli'' y extrajeron el ADN. Un gran número de cadenas cortas de ADN mostraba que la replicación era disconinuadiscontinua. La hipótesis fue posteriormente refrendada por el descubrimiento de la [[ligasa]], una enzima que une entre sí cortas secuencias de ADN.<ref name="pmid4967086">{{cita publicación |autor=Okazaki R, Okazaki T, Sakabe K, Sugimoto K, Sugino A |título=Mechanism of DNA chain growth. I. Possible discontinuity and unusual secondary structure of newly synthesized chains |publicación=Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America |volumen=59 |número=2 |páginas=598–605 |fecha = febrero de 1968 |pmid=4967086 |pmc=224714 |doi= 10.1073/pnas.59.2.598|url=}}</ref>

En 1968, el mismo equipo propuso que si el proceso de replicación de ADN era discontinuo, y utilizaba cadenas cortas que posteriormente se unían entre sí, por la ligas, entonces ''cadenas cortas de ADN recién sintetizado se acumularán en la célula si se incativainactiva temporalmente las ligasa''. Se infectaron bacterias ''E.coli'' con [[Bacteriófago T4]] que producía ligasa sensible a la temperatura. Las células infectadas, al exponerse a altas temperaturas, acumulaban un gran número de nuevas cadenas cortas de ADN, confirmando la hipótesis propuesta. También sirvió para descartar que las cadenas observadas en el experimento anterior hubieran sido producidas durante la extracción del ADN.<ref name="pmid4299945">{{cita publicación |autor=Sugimoto K, Okazaki T, Okazaki R |título=Mechanism of DNA chain growth, II. Accumulation of newly synthesized short chains in E. coli infected with ligase-defective T4 phages |publicación=Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America |volumen=60 |número=4 |páginas=1356–62 |fecha = agosto de 1968 |pmid=4299945 |pmc=224926 |doi= 10.1073/pnas.60.4.1356|url=}}</ref>