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Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos ([[Ácido micólico|ácidos micólicos]]) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las micobacterias como ''Mycobacterium tuberculosis'' y ''M. marinum'' se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se utiliza [[azul de metileno]] como tinción de contraste.
Debido a esto, está que esta muy influenciado con la enfermedad de tuberculosis.
==Técnica==
Esta técnica puede realizarse tanto en muestras histológicas (variante histológica) como citológicas (variante clásica).
===Variante histológica===
Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina. Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:
# [[ácido peryódico]] 58%
# carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado:
## 0,5 g fucsina básica
## 50 ml agua destilada
## 5 ml etanol absoluto
## 28,5 g cristales de fenol derretidos
# hematoxilina
# alcohol ácido 1%:
## alcohol de 35º
## ácido clorhídrico
El procedimiento es el siguiente:
# desparafinar e hidratar los cortes
# ácido periódico 5%, 10 min
# lavar con agua destilada
# fucsina fenicada, 15 min
# decolorar en alcohol ácido al 50%
# lavar con agua destilada
# hematoxilina, 10 min
# azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
# deshidratar, aclarar y montar preparaciones
====Resultados====
:BAAR: rojo-amarillo
:Núcleos: rosas
=== Variante clásica "en caliente" ===
# Hacer un [[frotis]] de la muestra.
## La fijación al calor asegurará de que el frotis quede adherido al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados falsamente negativos y un frotis muy grueso puede desprenderse del [[portaobjetos]] durante la tinción.
## Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de tinción con los extendidos hacia arriba.
# Dejar el frotis sobre el puente de tinción.
# Aplicar fucsina-fenicada.
## Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este período,
# Calentar con un mechero hasta la emisión de vapores (3-5 minutos).
## Se requiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada penetre y tiña la pared celular de la bacteria. No deje que hierva o se seque el colorante.
## Lave suavemente el colorante de cada portaobjetos con agua corriente fría hasta que toda la tinción libre quede lavada. Lave suavemente de manera que el extendido no se barra del portaobjetos. Retire el exceso de agua.
# Decolorar con alcohol-ácido.
## Cubra cada portaobjetos con la solución decolorante, tal como alcohol ácido y manténgalo sobre el portaobjetos durante 7 minutos. Si no se decolora suficientemente, el contenido del esputo que no son bacilos TBC puede permanecer teñido. Enjuague con agua una vez más los portaobjetos y quite el exceso de agua. Si los portaobjetos aún están rosa, aplique una cantidad adicional de la solución decolorante de 1 a 3 minutos.
# Aplicar azul de metileno (1 minuto).
## Aplique la solución de contraste, azul de metileno, durante 1 minuto.
# Enjuagar con agua
## Vuelva a enjuagar con un leve chorro de agua e incline cada portaobjetos hasta drenar el exceso de agua. Finalmente, coloque cada portaobjetos en una gradilla a que sequen al aire.
# Ahora colóquele una pequeñita gota de aceite de inmersión y haga la observación al microscopio con 10 x 100
===Variante clásica en "frío" (Tinción de Kinyoun)===
# Hacer un frotis.
# Dejarlo en el puente de tinción.
# Aplicar fucsina-fenicada (solución con fenol y mayor concentración de fucsina).
# Dejar en vasos coplin durante 20 minutos.
# Decolorar con alcohol ácido.
# Lavar con agua del grifo.
# Contrastar con azul de metileno
===Algunos microorganismos ácido-alcohol resistentes===
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