Diferencia entre revisiones de «Colorimetría (método químico)»

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Para usar el colorímetro, se deben hacer diferentes [[Disolución|soluciones]], incluido un control o referencia de concentración conocida. Con un colorímetro visual, por ejemplo, el colorímetro [[Jules Duboscq|Duboscq]], la longitud de la trayectoria de la luz a través de las soluciones se puede variar mientras se compara la luz [[Filtro óptico|filtrada]] transmitida a través de ellas para una coincidencia visual. La longitud de la trayectoria del tiempo de concentración se considera igual cuando los colores coinciden, por lo que la concentración de lo desconocido puede determinarse por proporciones simples.<ref>{{Cita libro|título=Four centuries of clinical chemistry|apellidos=Louis Rosenfeld|editorial=CRC Press|año=1999|isbn=978-90-5699-645-1|páginas=255–258|url=https://books.google.com/books?id=KPX6Yvax9jkC&pg=PA255&dq=chemical+duboscq+colorimetry&lr=&as_brr=3&ei=1l84SsOVDJqGkATV9-mlBQ#PPA257,M1}}</ref> Los [[Nessler tube|tubos de Nessler]] funcionan sobre el mismo principio.
 
También hay colorímetros electrónicos automatizados; antes de utilizar estas máquinas, deben calibrarse con una [[Cubeta (química)|cubeta]] que contenga la solución de control. La concentración de una muestra se puede calcular a partir de la intensidad de la luz antes y después de que pase a través de la muestra mediante la [[Ley de Beer-Lambert|ley de Beer-Lambert]]. Los analizadores fotoeléctricos llegaron a dominar en los años sesenta.
 
El color o la longitud de onda del filtro elegido para el colorímetro es extremadamente importante, ya que la longitud de onda de la luz que se transmite por el colorímetro tiene que ser la misma que la absorbida por la sustancia que se mide. Por ejemplo, el filtro en un colorímetro puede configurarse en rojo si el líquido es azul.
 
== Colorímetro de absorción ==
Un [[colorímetro]] es un dispositivo utilizado para probar la concentración de una solución al medir su absorbancia de una longitud de onda específica de la luz. Para usar este dispositivo, se deben hacer diferentes [[Disolución|soluciones]], y primero se coloca un control (generalmente una mezcla de [[Agua destilada|agua destilada]] y otra solución) en una [[Cubeta (química)|cubeta]] y se coloca dentro de un colorímetro para calibrar la máquina. Solo después de que se haya calibrado el dispositivo, puede utilizarlo para encontrar las densidades y/o concentraciones de las otras soluciones. Para ello, repita la calibración, excepto con las cubetas llenas con las otras soluciones. El filtro en un colorímetro debe configurarse en rojo si el líquido es azul. El tamaño del filtro elegido inicialmente para el colorímetro es extremadamente importante, ya que la longitud de onda de la luz que se transmite por el colorímetro tiene que ser la misma que la absorbida por la sustancia.
 
== Ensayos colorimétricos ==
Los ensayos colorimétricos utilizan reactivos que experimentan un cambio de color medible en presencia del [[analito]]. Son ampliamente utilizados en bioquímica para probar la presencia de enzimas, compuestos específicos, anticuerpos, hormonas y muchos más analitos. Por ejemplo,
 
* El [[para-nitrofenilfosfato]] se convierte en un producto amarillo por la enzima [[Fosfatasa alcalina|fosfatasa alcalina]].
* [[Azul de Coomassie|Coomassie Blue]] una vez que se une a las proteínas provoca un cambio de espectro, lo que permite la dosificación cuantitativa. Un ensayo colorimétrico similar, el [[ensayo de ácido bicinconínico]], usa una reacción química para determinar la concentración de proteína.
* [[ELISA|Los inmunoensayos ligados a enzimas]] utilizan anticuerpos complejados con enzimas para detectar antígenos. La unión del anticuerpo a menudo se deduce del cambio de color de reactivos como [[3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine|TMB]].
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[[Categoría:Química analítica]]