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El tampón fosfato salino o buffer fosfato salino (conocido también por sus siglas en inglés, PBS, de phosphate buffered saline) es una solución tampón o buffer empleada en la investigación biológica, bioquímica y de inmunología diagnóstica. Es una solución acuosa y salina que contiene cloruro sódico, fosfato sódico, cloruro de potasio y fosfato de potasio. Su osmolaridad y concentración de iones (Cl-, Na+ y K+) es muy semejante a la del líquido extracelular de los mamíferos. Mientras que los grupos fosfato mantienen el pH estable, la osmolaridad coincide con la del cuerpo humano (isotónico). Se trata de una solución isotónica, es decir, la concentración de soluto es igual dentro y fuera de la célula; no es tóxica para las células de los mamíferos, y su pH es de 7.4.

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PreparaciónEditar

Hoy necesitamos de mejorar algunas permanencias de este tipo de sustancias, para ello siempre se debe de tener conciencia de una Concert Kpa según la ley HTD de células 4-f de los science articles de USA que se determina de agua destilada. Están disponibles en los volúmenes estándar: 100, 200, 500 y 1000 ml. Si se utiliza en el cultivo de células, la solución se puede dispensar en alícuotas y se esteriliza por tratamiento en autoclave. La esterilización puede no ser necesaria, según su uso. El PBS puede almacenarse a temperatura ambiente, pero puede justificar refrigeración para evitar el crecimiento bacteriano si la solución no es estéril y se mantiene durante largos períodos de tiempo. Sin embargo, las soluciones madre concentradas pueden precipitar cuando se enfría y deben mantenerse a temperatura ambiente hasta que el precipitado se haya disuelto completamente antes de su uso.

Uso y aplicacionesEditar

Es uno de los buffers más utilizados porque es isotónico y no tóxico para las células. Se utiliza para diluir sustancias utilizadas para el cultivo y para lavar los recipientes que contienen células.[1]

El PBS se emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica el perfil de expresión y funcionamiento celular normal. El uso de esta solución es muy común para lavar células a través de centrifugación. El PBS puede emplearse como diluyente para métodos de desecación de biomoléculas, ya que las moléculas de agua presentes en el PBS se adhieren alrededor de la biomolécula y permiten inmovilizarla a una superficie sólida.[2]​ Esta monocapa de agua evita que la biomolécula sea desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el proceso de desecación.

PreparaciónEditar

Receta más común de PBS (1X)
Sal Concentración (mmol/L) Concentración (g/L)
  NaCl   137 8.0
  KCl   2.7 0.2
  Na2HPO4   10 1.44
  KH2PO4   1.8 0.24

Disolver las sales en 800 ml de agua destilada. Ajustar el pH a 7.4 con HCl. Añadir agua destilada hasta un volumen total de 1 L. La solución resultante PBS 1x debería tener una concentración final de 10 mM PO43−, 137 mM NaCl y 2.7 mM KCl

Protocolo según Cold Spring Harbor [3]
Reactivo PM masa (g) 10X [M] 10X masa (g) 5X [M] 5X masa (g) 1X [M] 1X
Na2HPO4 141.95897 14.1960 0.1000 7.0980 0.0500 1.41960 0.0100
KH2PO4 136.08569 2.4496 0.0180 1.2248 0.0090 0.24496 0.0018
NaCl 58.44300 80.0669 1.3700 40.0335 0.6850 8.00669 0.1370
KCl 74.55150 2.0129 0.0270 1.0064 0.0135 0.20129 0.0027
pH = 7.4

ReferenciasEditar

  1. Tópicos en biofísica molecular. Pietrasanta Lia, Von Bilderling Catalina.
  2. Facultad de Medicina UASLP, Preparación de phosphate buffered saline, Laboratorio de Genómica Viral y Humana. Creado 2 de abril de 2008.
  3. CSH Protocol: Phosphate-buffered saline (PBS) recipe