Diferencia entre revisiones de «Clonación»

Contenido eliminado Contenido añadido
Vemaga (discusión · contribs.)
Sin resumen de edición
m Revertidos los cambios de Vemaga (disc.) a la última edición de Tirithel
Línea 19:
 
En la práctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la secuencia a clonar tiene que estar vinculada a un origen de replicación; que es una secuencia de ADN capaz de dirigir este proceso, además se necesitan otras características determinadas y una variedad de vectores de clonación. La clonación de cualquier secuencia de ADN incluye los siguientes pasos:
*[[Fragmentación genética|Fragmentación]]: Inicialmente, el ADN de interés necesita ser fragmentado para proveerproporcionar un segmento relevante de ADN de un buen tamaño. La preparación de los fragmentos para la clonación se obtiene usando la técnica del [[Reacción en cadena de la polimerasa|PCR]], pero también puede hacerse por medio de la digestión con [[enzimas de restricción]] y a veces fraccionando mediante el uso de la [[electroforesis en gel]].
*[[Ligación]]: Un procedimiento de ligación se emplea cuando el fragmento amplificado se inserta en un [[vector biológico|vector]]. Dicho vector (que generalmente es circular) se convierte en una secuencia lineal utilizando enzimas de restricción, y es incubado con el fragmento de interés, bajo las condiciones apropiadas, con unala enzima llamada [[ADN ligasa]].
*[[Transfección]]: Después de la ligación, el vector con el gen de interés se transfecta a una [[célula]]. Comúnmente se utiliza la [[electroporación]], aunque existe un gran número de técnicas alternativas.
*[[Selección]]: Las células transfectadas se cultivan. Como este procedimiento actualmente se considera de baja eficiencia, se deben identificar las colonias de células que han sido exitosamente transfectadas con el vector que contiene el gen deseado. Para ello existen vectores de clonación que incluyen marcadores de resistencia a los [[antibiótico]]s, con los que sólo las células que han sido transfectadas pueden crecer. Existen otros vectores que permiten la selección gracias a otros métodos.
 
=== Clonación celular ===
Línea 47:
 
También se incluye la obtención de gemelos idénticos de manera natural o artificial. La forma natural se considera como una alteración espontánea durante el desarrollo embrionario, ignorándose su causa, aunque existe una correlación familiar estadísticamente significativa. El método artificial se realiza por separación mediante manipulación de los blastómeros, debilitando las uniones celulares con tripsina y medio pobre en Ca<sup>2+</sup>, o manualmente partiendo el blastocisto por la mitad (muy corriente en vacas).
 
 
=== Clonación de organismos congelados ===
Línea 54 ⟶ 53:
El principal problema de la [[congelación]] es la degradación del [[ADN]]. Cuando se necesita mantener células de un organismo, es necesario utilizar un [[criopreservante]], como son algunos [[glúcidos]] como la [[trealosa]], [[glucosa]] o [[glicerol]], que permiten mantener la célula sin daños, porque disminuyen la temperatura de congelación del [[agua]]. Cuando se congela una [[célula]] directamente, se producen daños en la estructura celular debido a la [[cristalización]] del agua. El [[ADN]] además se daña irreparablemente, lo que haría imposible su utilización para una eventual clonación.
 
Recientemente un equipo de [[investigación]] [[japonés (etnia)|japonés]], liderado por Sayaka Wakayama, en el Centro de [[Biología]] del Desarrollo del Instituto RIKEN en Kobe, ha clonado un ratón que ha permanecido '''16 años congelado a -20 ºC'''. Utilizando [[célula]]s del cerebro, las cuales mantienen en su [[citoplasma]] una mayor cantidad de [[glucosa]], que funcionó como [[criopreservante]], lo que permitió mantener el [[ADN]] y las células nerviosas intactas durante todo ese tiempo.<ref>[http://www.pnas.org/content/105/45/17318.abstract Científicos 'logran clonar ratón congelado 16 años']</ref>
 
== Clonación humana ==
La clonación humana es la creación de una copia genéticamente idéntica a una copia actual o anterior de un ser humano.
Existen dos tipos de clonación humana:
 
-Clonación terapéutica.
 
-Clonación reproductiva.
 
La clonación terapéutica implica la clonación de células de un individuo adulto para su posterior uso en medicina (como hemos visto en el apartado de clonación terapéutica).